Tiosbio^® Marathon DNA Polymerase为带有校读功能的DNA 聚合酶，具备超高保真度和扩增效率，优秀的延伸性，同时结合热启动技术，可最大限度地提高 PCR 扩增的成功率，是完成高GC含量序列扩增，序列突变，及其它需要极佳序列准确度实验的理想选择。

Tiosbio^® Marathon DNA Polymerase可耐受血液样本对PCR的抑制作用，能够直接从血液样本中扩增目的序列；动、植物组织样本也只需使用本公司相应的动物组织裂解液（BT0311）、植物组织裂解液（BT0312）对样本进行简单处理，即可使用裂解液做为PCR扩增的模板，避免进行繁复的DNA提取步骤。使用时只需加入模板、引物和灭菌水即可进行 PCR 扩增，大大简化了试验操作，提高了试验效率。

BT0016包装量为50次份（50μL/次），各组分均保存于-20℃，其中:

*2×Marathon PCR Buffer保存于-20℃时为液体状为态（不会冻结），保存温度低于-20℃可能会冻结，需完全融解并充分混匀后使用，冻融过程不影响品质，请放心使用。

（1）为保证PCR的顺利进行：

1）PCR扩增时使用薄壁PCR管，推荐反应体积为50μL。

2）灭菌水、引物请事先分装成小份保存，尽可能避免污染。

3）引物长度一般为22~35nt（Tm值>60℃），无二级结构，并避免形成引物二聚体。

4）长片段扩增时，长度应在25~35nt，Tm值>65℃，且3΄端尽量避免高GC含量序列。

5）模板DNA的长度与纯度对PCR的结果有很大的影响。模板量充裕的情况下，建议事先进行模板的琼脂糖凝胶电泳，以确认模板的品质。

（2）PCR扩增产物的克隆

1）Marathon DNA Polymerase的扩增产物为平末端，该扩增产物经多功能DNA纯化回收试剂盒（BT0091）纯化后，可使用本公司的Tiosbio® Blunt Zero Vector（TD0201）进行产物的克隆。或是使用5΄端磷酸化的引物进行扩增，或将PCR扩增产物的末端磷酸化后，方能进行平末端的克隆。

2）Marathon DNA Polymerase具有3΄→5΄的外切酶活性，如需对PCR产物进行限制性内切酶的处理，再利用酶切后的突出末端进行克隆时，需要在酶切处理前先对扩增产物进行纯化。PCR扩增产物经苯酚/氯仿处理后，进行乙醇沉淀，或使用本公司生产的多功能DNA纯化回收试剂盒（BT0091）回收PCR扩增产物。

Marathon PCR Buffer保存于-20℃时为液体状为态（不会冻结），保存温度低于-20℃可能会冻结，需完全融解并充分混匀后使用，冻融过程不影响品质，请放心使用。