1.Tiosbio^® GelRed^®是新型无毒核酸染料，GelRed^®独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏实验表明其诱变性远远小于EB。

2.灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

3.稳定性高：适用于微波或其它加热方法制备的琼脂糖凝胶；室温下的酸、碱缓冲液极其稳定，耐光性强。

4.耐光性强：实验室的日常光线照射6个月仍可保证性能稳定。

5.信噪比好：样品荧光信号强，背景信号低，荧光亮度是EB的10倍以上，肉眼可观测到亮度明显比EB强。

6.操作简单：与EB一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

7.适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。

8.完美兼容：与EB有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的EB 滤光片或SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300nm紫外光附近可得到最佳激发。

 

名称	GelRed®	GelGreen®	Sybr Green I	EB	Goldview
灵敏度	高	高	高	低	低
稳定性	高	高	低	高	高
对DNA 迁移影响	条带不弯曲	条带不弯曲 DNA不迁移	染料浓度高时， 条带易发生弯曲迁移	条带不弯曲 DNA不迁移	条带不弯曲 DNA不迁移
安全性	安全无毒。独特的油性大分子量；不易挥发；不易吸入；不能穿透细胞膜进入活体细胞，无诱变性，无致癌性	安全无毒。独特的油性大分子量；不易挥发；不易吸入；不能穿透细胞膜进入活体细胞，无诱变性，无致癌性	花箐染料，能透过细胞膜进入活体细胞内，但容易生物降解，不会在体内残留，安全无毒。	分子量小，易挥发升华，易吸入人体，不易生物降解，在体内长期残留。易引起有机体突变，强诱变剂和高致癌物。	主要成分为吖啶橙，高毒，致癌，高诱变性。易挥发升华，易吸入人体，能穿透细胞膜进入活体细胞内，不易生物降解，体内长期残留。
适用性	与EB光谱特性一致，无需改变滤光片及观察装置。普通紫外凝胶透射仪可用，300nm 紫外光附近可得到最佳激发。	254nm紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。	>100bp产物电泳染色， 254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。	>100bp产物电泳染色，背景荧光信号高；普通紫外凝胶透射仪观察。	>100bp产物电泳染色，背景荧光信号高； 254nm 激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

500μL/支。

2~8℃避光保存12月。

Q：GelRed^®/GelGreen^®与核酸的结合机制是什什么？

A：GelRed^®/GelGreen^®通过静电及电荷相互作用与核酸结合。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®检测下限多少？

A：GelRed^®/GelGreen^®是超敏感的染料，可检测含量低至0.1ng的DNA。仪器灵敏度和曝光设置均影响检测极限。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®的使用量是多少？

A: 10000×储备液用于1×甚至0.5×预制凝胶使用量1:10000～1:20000(例如: 5μL用于50～100mL 凝胶)，或1:3333 比例用于电泳后染色(15μL用于50 mL溶液)。

 

Q：GelRed^®/ GelGreen^®需要在黑暗中使用吗？

A：GelRed^®和GelGreen^®长期储存需避光，但可在室内光线下使用。

 

Q：哪些仪器可用于GelRed^®和GelGreen^®的检测？

A：标准（302或312nm）紫外透射成像仪可用于检测GelRed^®。254 nm的紫外透射仪、可见光激发的凝胶成像仪（如Dark Reader）或488nm凝胶激光扫描仪均可检测GelGreen^®。

 

Q：GelRed^®和GelGreen^®适用于什么样的发射滤波片？

A：GelRed^®适用于溴化乙锭滤片; GelGreen^®适用于SYBR Green或黄色滤片。另外，GelRed^®或GelGreen^®均适用于长通道黄色滤片。

 

Q：marker电泳为何有时分辨率会不高？

A：GelRed^®比EB 分子大，在预制胶中对DNA 的迁移有一定影响。建议采用后染法以保证DNA迁移的真实水平。

 

Q：如何提高预制凝胶的条带分离效果？

A：①减少DNA上样量。过量的DNA样本容易造成污染和微笑条带。推荐已知浓度样品的上样量为50~200ng/泳道。对于未知浓度的样品，尝试1/2或1/3的常用上样量。

   ②减少GelRed^®在凝胶中的总量，GelRed^®再稀释一倍后使用比如用0.5×的浓度来代替1×的浓度。

   ③降低琼脂糖凝胶的百分比浓度。高分子量DNA在低百分比的琼脂糖凝胶分离效果更好。

   ④更换电泳缓冲液。含硼酸盐的TBE 缓冲液导电性比TAE缓冲液更好。

   ⑤为了避免染料可能对DNA迁移的干扰，建议使用电泳后染胶。

   ⑥电泳时电压不宜过高，一般TBE缓冲也电压不要超过120V，TAE 不要超过 100 V。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®迁移的方向？

A：相对EB，GelRed^®和GelGreen^®不容易通过凝胶迁移。电泳缓冲液中不需要添加额外的染料，凝胶染色更均匀。

Q: 为何有时会出现污染或微笑的DNA条带或错误的DNA迁移条带?

A: GelRed^®和GelGreen^®在预制凝胶电泳中会影响DNA 的迁移，尤其国产的某些限制性酶切marker或DNA样本，可能会在GelRed^®预制凝胶中发生异常迁移。

Q：GelRed^®荧光弱，性能降低，或后染法琼脂糖凝胶中仍有染料是什么原因?

A : 溶解的染料可能沉淀了。将GelRed^®45~50℃加热2min，搅拌至染料溶解。另外应室温储存染料，以免沉淀。

 

Q：后染法需要去除染料的步骤吗？

A: 不需要，但高背景的凝胶可通过适当脱色降低背景。

 

Q： GelRed^®和GelGreen^®可用于单链DNA或RNA的染色吗？

A：可以，GelRed^®对单链核酸染效果比GelGreen^®敏感5倍左右。

 

Q：GelRed^®/ GelGreen^®凝胶可以预制、储存吗？

A：完整的GelRed^®/GelGreen^®预制琼脂糖凝胶可在4℃避光贮存。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®的预制胶可以重复使用吗？

A：不可以，连续电泳会降低染色强度。

 

Q: 预制的GelRed^®/GelGreen^®凝胶可以重新融化再制备吗？

A: 是的，预制胶溶化后最好再添加一些染料，保证重新制备凝胶的信号强度。

 

Q：GelRed^®/ GelGreen^®电泳后染色可重复使用吗？

A：可以。如果敏感度降低，则建议更换新鲜的染料溶液。

 

Q：GelRed^®及GelGreen^®与克隆、连接、测序的下游扩增子兼容吗？

A: 兼容。由于GelRed^®/GelGreen^®与DNA结合比EB更紧密，需要去除样品DNA中的染料，以确保后续操作。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®安全性如何？

A：GelRed^®/GelGreen^®经过埃姆斯AMS及相关测试，已经被证明是可替代EB和SYBR，更安全的染料。但使用这些试剂也要遵循实验室安全条例，以免污染DNA等样品。

 

Q：GelRed^®和GelGreen^®用后应该如何处置？

A：GelRed^®和GelGreen^®通过TUV认证测试，及中国农科院的斑马鱼测试，可以直接倒入下水道。但不同国家和地区的规定可能存在差异，请联系当地的安全监管部门获取相关信息。

 

Q：GelRed^®可用于脉冲凝胶电泳和凝胶迁移电泳分析吗？

A：可用于EMSA和PFGE凝胶的电泳后染色。

 

Q：GelRed^®/GelGreen^®染色的胶可用于Southern或Northern杂交吗？对转膜或杂交过程有干扰吗？

A: 建议使用后染法。

 

Q：GelRed^®可以用于检测RNA的甲醛变性胶吗？

A: 可以。

 

Q：GelRed^®可用聚丙烯酰胺、DGGE、EMSA 实验或PFGE（脉冲场）凝胶吗？

A：可以，需使用后染法。

 

Q：GelRed^®可用于彗星试验（单细胞凝胶电泳测定技术，一种单链或双链DNA突变和破损的遗传测定法）吗？

A: 可以。

 

Q：GelRed^®可用于碱性凝胶电泳缓冲液（30mM NaOH，1mM EDTA）吗？可用于氯化铯梯度纯化DNA的染色吗？

A: 可以。正丁醇萃取前，加SDS至终浓度0.1％，可去除纯化的DNA中的GelRed^®。

 

Q：GelRed^®和GelGreen^®在DMSO 和水中两种溶剂中的溶解性及效果是否存在差异？

A: 两种溶剂的效果相似。