SUPERSWITCH™ 5’RACE cDNA合成试剂盒通过扩增基因的5’和3’末端精细、有效地完整克隆基因。SUPERSWITCH™ RACE方法可有效地在样品cDNA 5 ‘和3 ‘末端加入人工接头,尽可能地形成最完整的RACE产物。反转录步骤后合成的第一链cDNA可直接用于5’和3’ RACE PCR反应,无需再进行繁复的第二链cDNA合成和接头连接的过程。其他RACE方法均因扩增的高背景和截短的5 ‘末端而存在明显的劣势。优化后的方法既便是在样本很小的情况下,也可以显著降低非特异性的扩增,且只需单一PCR管和两步法的程序就可使您的RNA样品合成cDNA。
此外,SUPERSWITCH™技术由于避免了接头连接的步骤,在RACE PCR过程中直接使用cDNA作为模板,从而降低了RACE的过程的复杂性,并使其更快捷(Chenchik et al,1998),操作时间更缩短至4个小时。
SUPERSWITCH™ PCR RACE Kit也对PCR过程也进行了优化,增加RACE反应的灵敏性的同时,降低了试验背景。因此,试验者可用很少的mRNA或是总RNA作为反转录的模板来构建全长cDNA。
技术流程:

剂盒组成:
根据试验样品购买相应的试剂盒,以达到最好的试验效果!
| 目的 | 试剂 | ST0011/ ST0091/ ST0111 | ||
| S/5次 | L/10次 | |||
| 反 转 录 | 1 | ●SUPERSWITCH™ 3RRT1 Oligonucleotide | 6μL | 12 μL | 
| 2 | ●SUPERSWITCH™ 3RRT2 Oligonucleotide | 6μL | 12 μL | |
| 3 | ●dNTP Mix (10 mM) | 20 μL | 40 μL | |
| 4 | ●Deionized H2O | 100 μL | 100 μL | |
| 5 | ●5X First-Strand Buffer (RNase-Free) | 30 μL | 60 μL | |
| 6 | ●SUPERSWITCH™ SolutionⅠ | 5 μL | 10 μL | |
| 7 | ●SUPERSWITCH™ SolutionⅡ | 5 μL | 10 μL | |
| 8 | ●RNase Inhibitor (40 U/μL) | 6 μL | 12 μL | |
| 9 | ●SUPERSWITCH™ Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 6 μL | 12 μL | |
| 10 | ●SUPERSWITCH™ 5RRT Oligonucleotide | 6 μL | 12 μL | |
| PCR | 11 | ●5AP PCR Primer (12 μM) | 30 μL | 60 μL | 
| 12 | ●3AP PCR Primer (12 μM) | 30 μL | 60 μL | |
| 13 | ●10×SUPERSWITCH™ Hot Start Buffer | 100 μL | 200 μL | |
| 14 | ●dNTP Mix (2.5 mM of each dNTP) | 200 μL | 400 μL | |
| 15 | ●SUPERSWITCH™ Hot Start DNA polymerase(5U/μL) | 10 μL | 20 μL | |
技术流程:
