工作原理:

TIOSBIO® 探针一步法RT-qPCR FTL Premix是一种即用型、单管式的2× RT-qPCR预混液，可在单个反应管内同时高灵敏性地完成多达4个RNA / DNA样本靶标的检测。该预混液包含热稳定的MMLV逆转录酶、FTL DNA聚合酶、dNTP和反应缓冲液。室温条件下，改进的Buffer和FTL DNA聚合酶具有高稳定性，可高度耐受来源于粗样品的PCR抑制剂，尤其适用于病原体检测等应用中检测低丰度RNA靶标，可用于一站式自动化高通量测试系统。另外，该预混液可最大程度地避免交叉污染的风险，适用于快速RT-qPCR，及样品宽动态范围内靶标的检测和准确定量。

预期用途:

RNA样本靶标的RT-qPCR检测，或DNA样本靶标的qPCR检测。

产品特点:

1. 快速简便、灵敏度高。该试剂盒以探针一步法RT-qPCR对低拷贝靶标进行快速、高灵敏性的定量，适用于定量检测低水平表达的RNA 、DNA病毒或mRNA。
2. 适用于多重PCR反应。FTL DNA聚合酶反应特异性更高，酶动力更强，特别适用于多重PCR反应。可同时高灵敏性地完成多达4个RNA / DNA样本靶标的检测。
3. 卓越的宽动态范围靶标检测能力，兼容RNA和DNA样本。该试剂盒经过反复优化，无论是RNA或是 DNA靶标，均表现出高特异性扩增，并在宽动态范围的获得可重复的Ct值，操作流程大幅简化，检测效率显著提升。
4. 广泛的仪器兼容性。该试剂盒可以在快速或标准循环模式下运行，在不同定量PCR仪上可稳定扩增，表现一致。添加了50×ROX Reference dye（未提供）后，该试剂盒可用于需要ROX Reference dye的定量PCR仪。

抗污染能力强。试剂盒以dUTP替代dNTP中的dTTP，扩增后的PCR产物中包含dU碱基。含有气溶胶污染的dU PCR产物，可通过添加尿嘧啶-N-糖基化酶（UNG）（未提供）进行降解，从而去除产物气溶胶的假阳性

包装规格/货号:

包装规格：250次，货号JY0501。

储存条件及有效期:

可于4℃条件下保存2个月，如需长期保存，应将试剂盒避光保存于-20℃以下。

-应在逆转录步骤之前添加UNG处理步骤。反应体系、反应温度和时间均应根据相应试剂盒说明书进行。

-反转录步骤的反应温度和时间可在50~60°C，5~15min间进行优化。

-预变性步骤的反应温度和时间可在95~98°C，10sec~5min间进行优化。

-变性步骤的反应温度和时间可在95~98°C，3~10sec间进行优化。

-延伸/退火步骤的反应温度和时间可在60~65°C，5~20sec间进行优化。

1. 本产品仅供科研使用。使用前请仔细阅读说明书，严格按照说明书操作。违反或者未按说明书进行操作可能导致错误结果。
2. 产品应依照说明书要求，储存于合适的环境和温度下，并在有效期内使用。储存不当或产品过期可能导致错误结果。
3. 为避免交叉污染和气溶胶污染，试剂加样区和扩增区不能在同一个房间。
4. 试验体系中已经含有终浓度为5mM的MgCl₂。当使用粗样品直接进行RT-qPCR时，需要在2.5~8mM间优化MgCl₂的终浓度。
5. 检测结束后将反应管及时放入密封袋，进行无害化处理。
6. 所有检测样本及试剂均按照传染性物质对待，实验过程中做好工作人员的防护并避免交叉污染。
7. 不能使用过有效期的产品。